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【測定原理】

應(yīng)用均相競爭原理，標準或樣品中的FSH和加入的¹²⁵I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競爭性免疫結(jié)合反應(yīng)。¹²⁵I-FSH與抗體的結(jié)合量與標準或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測定結(jié)合部分的放射性強度，并計算相應(yīng)結(jié)合率B/B₀。用已知FSH標準含量與對應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標準曲線。從標準抑制曲線上查知對應(yīng)結(jié)合率的待測樣品中FSH的含量。

試劑配制、使用方法和保存

• FSH標準品：液體，直接使用，標準濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標準2~8℃保存，42天內(nèi)穩(wěn)定；未開蓋的標準品2~8℃保存，標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• ¹²⁵I-FSH：凍干品，用蒸餾水溶解，100管10ml溶解，50管5ml溶解。如一次加樣超過100管，兩瓶混合后使用。標記物放射性不大于111KBq(3μCi)，2~8℃保存，標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 兔抗-FSH抗體：凍干品，用蒸餾水溶解，溶解方法見封底。同次實驗抗體加樣超過100管時，兩瓶溶解后混合使用?？贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 驢抗兔免疫分離劑：液體，直接使用，但加樣前必須搖勻！2~8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后zui多穩(wěn)定45天。若加樣超過100管，兩瓶混合后搖勻。
• FSH質(zhì)控血清：使用方法，保存條件，有效期及附值，詳見質(zhì)控血清使用說明書。

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數(shù)據(jù)處理

• 聯(lián)機處理: 由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
• 手工作圖或計算器處理:
  • 百分結(jié)合率計算：設(shè)S₀管計數(shù)為B₀，各標準管或樣品管計數(shù)為B，非特異管計數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計算公式為

B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×

3.2.2 logit計算：各標準點或樣品管的logit值計算公式為

logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標準濃度取log值為橫坐標，對應(yīng)的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標，對應(yīng)的B/B₀為縱坐標在log-logit坐標紙上畫出標準曲線（理想化時是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B₀可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

3.3 標準曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。濃度單位mIU/ml

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