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ATPase 染色液使用方法！

產(chǎn)品說(shuō)明：

三腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一種水解酶，是催化 ATP 合成的一種酶。三腺苷酶根據(jù)所用激活劑、抑制劑以及酶定位的不同分為膜性三腺苷酶、肌球蛋白三腺苷酶、線粒體三腺苷酶等。ATPase 能水解三腺苷為腺苷和，此酶只作用于與之間的高能鍵，因而釋放大量能量。


其催化反應(yīng)如下：A-P-P-P + H2O→A-P-P + H3PO4 +能量。

ATPase 染色(鈣鈷法)原理在于三腺苷酶水解三腺苷為二磷腺苷和，根與鈣離子結(jié)合為鈣沉淀，再被置換為鈷，終產(chǎn)物為黑色沉淀。

規(guī)格：5×50ml

保存：4℃,避光,

有效期：6個(gè)月

用途：腺苷三酶染色，主要由孵育液、硝酸鈷、硫化銨、陰性對(duì)照孵育液等組成。酶活性部位呈棕黑色或黑色。

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操作步驟：

1. 冰凍切片直接入蒸餾水。

2. 一張切片入堿性預(yù)孵育液室溫孵育 15min。另一張切片入酸性預(yù)孵育液室溫孵育 5min，再入堿性預(yù)孵育液 30s。

3. 切片同時(shí)入 ATPase 孵育液，孵育 30-45min。

4. 1%氯化鈣洗三次，每次 1min。。

5. 入 Co 溶液 3min，蒸餾水充分洗 4-5 次，流水沖洗 2min。

6. 在上述過(guò)程中配制 ALP 硫化工作液，即取試劑(E)用蒸餾水稀釋 50 倍, 即為 ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液孵育 1-2min。

7. 流水洗 10min 后，入蒸餾水。

8. 切片經(jīng) 95%乙醇溶液及無(wú)水乙醇脫水。

9. 二甲苯透明，樹膠封片。

ATPase 染色液使用方法！

注意事項(xiàng)：

1. 切片入孵育液前后不可用水沖洗。

2. 若要顯示肌肉 ATPase 新鮮組織必須速凍后切片。

3. ALP 硫化液具有腐蝕性和刺激性氣味，應(yīng)小心操作。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。、

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ATPase 染色液使用方法！